miRNA-4262通过靶向神经调节蛋白1调控非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用机制

• 作者: 徐文举 王旭 袁五营
• 来源期刊: 癌症进展
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-4262 NRG1 非小细胞肺癌 增殖 侵袭 转移
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11877/j.issn.1672-1535.2020.18.02.07

摘要

目的 探讨miRNA-4262通过靶向神经调节蛋白1(NRG1)调控非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭、迁移的作用机制.方法 采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞A549、H1299、H1650中miRNA-4262、NRG1的表达水平,Western blot检测转染后A549细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、MMP14的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,双荧光素酶报告实验及Western blot分析miRNA-4262与NRG1的关系.结果 与正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,NSCLC细胞株A549、H1299、H1650中miRNA-4262的表达水平明显升高,NRG1 mRNA及NRG1蛋白表达水平明显降低(P﹤0.01),选择A549细胞进行后续实验.与anti-miRNA-NC组比较,抑制miRNA-4262表达后,anti-miRNA-4262组48、72 h的细胞活性、侵袭和迁移细胞数目及cyclin D1、MMP2、MMP9、MMP14蛋白表达水平均明显降低,p21、p27蛋白表达水平均明显升高(P﹤0.01).与pcDNA组比较,过表达NRG1后,pcDNA-NRG1组中NRG1、p21蛋白表达水平均明显升高,48、72 h细胞活性、侵袭和迁移细胞数目及cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平均明显降低(P﹤0.01).TargetScan生物信息学软件预测结果显示,miRNA-4262与NRG1的3'UTR存在特异性结合位点,双荧光素酶报告实验和Western blot进一步证实miRNA-4262与NRG1直接结合负向调控NRG1的表达.与anti-miRNA-4262+si-NC组比较,在稳定低表达miRNA-4262的细胞中沉默NRG1基因后,anti-miRNA-4262+si-NRG1组中NRG1、p21蛋白表达水平均降低,48、72 h的细胞活性、侵袭和迁移细胞数目及cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平均升高(P﹤0.05).结论 miRNA-4262通过靶向抑制NRG1的表达,促进NSCLC的增殖、侵袭和迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旭	河南省胸科医院微创外科	28	92	6.0	9.0
2	袁五营	河南省胸科医院微创外科	32	87	5.0	8.0
3	徐文举	河南省胸科医院微创外科	4	0	0.0	0.0