利拉鲁肽对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制

• 作者: 刘源 申娟 祁华琪 聂晓东
• 来源期刊: 中国循证心血管医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 利拉鲁肽 血管平滑肌细胞 信号通路 增殖
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1218-1222
• 页数: 5页
• 分类号: R543
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4055.2020.10.15

摘要

目的 观察利拉鲁肽(LIR)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,并对其可能机制进行探讨.方法 实验分6组:空白对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+LIR(25、50、100 nM)组、LIR(100 nM)组;细胞接受不同干预因素刺激后,采用锥虫蓝染色检测LIR的细胞毒性;细胞增殖检测试剂盒CCK-8及Brdu检测细胞增殖及DNA合成;流式细胞仪检测细胞周期;实时荧光定量RT-PCR检测调控细胞周期相关蛋白的基因表达;酶标仪检测活性氧(ROS)的产生;蛋白印迹法(Western blot)对可能机制进行探讨.结果 ①细胞毒性:PDGF-BB和/或LIR(25、50、100 nM)对VSMCs无毒性.②增殖作用:PDGF-BB干预48 h可显著诱导VSMCs增殖及DNA合成(P<0.01),LIR(25、50、100 nM)与PDGF-BB联合干预则可呈浓度依赖性的抑制细胞增殖及DNA合成(P均<0.01);对细胞周期的影响:LIR可阻滞G0/G1期细胞向S期过渡;与对照组相比,PDGF-BB组中细胞周期蛋白依赖性激酶6、4(CDK6,CDK4)、细胞周期蛋白D1、E(CyclinD1,CyclinE)的基因表达均明显增加(P均<0.01),细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P27(P27)的表达下调(P<0.01),LIR(100 nM)与PDGF-BB联合干预后可逆转这种现象.③ROS的产生:与对照组相比,PDGF-BB组中ROS的水平显著提高(P<0.01),LIR(25、50、100 nM)与PDGF-BB联合干预后可呈浓度依赖性的抑制ROS的产生(P均<0.01).④机制探讨:与对照组相比,PDGF-BB组中JNK、ERK1/2及p38的磷酸化水平均显著升高(P均<0.01);与PDGF-BB组相比,LIR(100 nM)与PDGF-BB联合干预后,ERK1/2和p38的磷酸化水平均显著降低(P均<0.01),而JNK的磷酸化水平无显著变化.结论 LIR可通过抑制PDGF-BB诱导ROS的产生以及其下游ERK1/2和p38信号通路的活化发挥抑制细胞增殖的作用,为LIR预防和治疗血管重构相关疾病的提供了理论依据.