葡萄糖氧化酶在无孢黑曲霉中的重组表达及酶学性质

• 作者: 林晓彤 潘力 王斌 罗时渝
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 葡萄糖氧化酶 黑曲霉 高效表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 79-85
• 页数: 7页
• 分类号: TQ925
• 字数: 4886字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20181229-362

摘要

针对目前食品级葡萄糖氧化酶的工业生产产量不高,选择黑曲霉CBS513.88的葡萄糖氧化酶基因goxC,通过密码子优化、信号肽替换对其编码区进行改造,并利用强启动子PglaA、杂合启动子Pna2/tpi及营养缺陷标记pyrG构建表达载体,旨在构建高活力的葡萄糖氧化酶表达工业菌株.goxC表达载体转化低蛋白背景的黑曲霉SH2原生质体后,经营养缺陷标记pyrG筛选获得重组菌株,邻联茴香胺显色和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果显示,在SH2宿主中成功表达葡萄糖氧化酶,蛋白质大小约为80 kDa.500 mL摇瓶发酵在第7天时酶活力可达563.8 U/mL;50 L发酵罐发酵在179 h时酶活力最高,达到1 128 U/mL,相比摇瓶发酵提高了1倍多,在目前曲霉表达系统的相关表达研究中,本研究葡萄糖氧化酶表达量已达到较高的水平.酶学性质研究发现,重组葡萄糖氧化酶最适pH值为5.5,最适温度为45℃.综上所述,本研究成功实现了葡萄糖氧化酶在黑曲霉中的高效重组表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘力	华南理工大学生物科学与工程学院	71	587	16.0	20.0
3	王斌	华南理工大学生物科学与工程学院	54	380	12.0	18.0
7	罗时渝	华南理工大学生物科学与工程学院	3	0	0.0	0.0
8	林晓彤	华南理工大学生物科学与工程学院	1	0	0.0	0.0