基于对免疫功能的调节探讨柴银颗粒对人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证的治疗作用

• 作者: 关永霞 包蕾 孙静 崔晓兰 张贵民 时宇静 耿子涵 赵荣华 郭姗姗 高英杰 鲍岩岩
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 新型冠状病毒肺炎 疫毒袭肺证 柴银颗粒 人冠状病毒 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 中医药防治新型冠状病毒肺炎专题(四)
• 页码范围: 3020-3027
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20200419.401

摘要

根据国家主管部门对新型冠状病毒肺炎中医病证的分类,确定在寒湿证小鼠模型基础上感染人冠状病毒229E(HCoV-229E),形成人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证病证结合模型,该模型可模拟《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)》中医治疗普通型病证.具体步骤如下:建立寒湿证小鼠模型,在此模型基础上感染HCoV-229E,实验分为正常对照组,感染对照组,寒湿对照组,寒湿感染组(模型组),柴银颗粒高(8.8 g·kg-1·d-1)、低(4.4 g·kg-1·d-1)剂量组.感染当天给予柴银颗粒治疗,连续给药3d.末次给药第2天解剖取肺组织,计算肺指数及抑制率;提取肺组织核酸,实时荧光定量RT-PCR法检测病毒载量;分离血液白细胞,流式细胞术检测T和B淋巴细胞百分比;提取肺组织蛋白,ELISA法检测IL-6,IL-10,TNF-α及IFN-γ含量.体外实验采用细胞病变(CPE)抑制法,从药物的最大无毒浓度开始,测定柴银颗粒对HCoV-229E的抑制作用,按Reed-muench法计算50％细胞毒性浓度(TC50)、最大无毒浓度(TC0)、50％细胞抑制浓度(IC50)及药物治疗指数(TI).结果 显示,柴银颗粒高、低剂量能显著降低人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠的肺指数(P＜0.01),抑制率分别为61.02％,55.45％;显著升高人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠外周血CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、总B淋巴细胞百分比(P＜0.05,P＜0.01);显著降低人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠肺组织炎症因子1L-10,TNF-α,IFN-γ含量(P＜0.01).体外实验结果显示,柴银颗粒的TC50为4.46 mg·mL-1,TC0为3.13 mg·mL-1,IC50为1.12 mg·mL-1,TI为4;体外培养细胞对照组无HCoV-229E病毒核酸表达,病毒对照组HCoV-229E病毒核酸表达量为1.48× 107 copies/mL,柴银颗粒在3.13,1.56 mg·mL-1剂量时可明显降低HCoV-229E病毒核酸表达,核酸表达量分别为9.47× 105,9.47× 106 copies/mL.柴银颗粒对小鼠人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证有较好的疗效,可能通过增强机体免疫能力,降低肺细胞炎性因子表达发挥作用.