转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察

• 作者: 于云祥 刘小涛 李彬彬 柯文 龚泰芳
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA慢病毒载体 骨肉瘤 U2-OS细胞 细胞增殖能力 细胞凋亡能力
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: R681
• 字数: 3825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2020.12.003

摘要

目的 观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化.方法 以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2mRNA、蛋白.在U2-OS细胞中转染ATAD2shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白Ⅴ-FITC(Annexin Ⅴ-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白.结果 骨肉瘤细胞中ATAD2mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均＜0.05).ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞中ATAD2表达水平下降(P＜0.05).转染ATAD2shRNA后的骨肉瘤细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达升高,CDK2、CyclinD1蛋白表达降低(P均＜0.05).结论 转染ATAD2 shRNA可抑制U2-OS细胞增殖,并诱导细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小涛		4	18	3.0	4.0
2	李彬彬		2	6	1.0	2.0
3	龚泰芳		7	19	3.0	4.0
4	于云祥		1	0	0.0	0.0
5	柯文		1	0	0.0	0.0