抑癌因子miR-10a抑制Tiam1表达对胃癌细胞凋亡和迁移的影响

• 作者: 吴江 岳跃明 庞澜 张荔霜 朱勇荷 阿里木江·阿不都热合曼 陈鹏 马秀英
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 miR-10a Tiam1 细胞凋亡 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2830-2837,2867
• 页数: 9页
• 分类号: R-33|R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2020.15.006

摘要

目的:探讨miR-10a抑制Tiam1表达对胃癌细胞凋亡和侵袭的影响.方法:获取胃上皮组织细胞及胃癌组织细胞,利用qPCR及Western blot实验检测两种细胞中miR-10a表达与Tiam1的mRNA及蛋白表达水平,同时检测胃癌细胞S746T及正常胃粘膜细胞RGM-1和NGEC中miR-10a表达与Tiam1蛋白表达水平.通过将miR-10amimic和miR-10a inhibitor转染HS746T细胞,利用流式细胞术检测HS746T的细胞周期和细胞凋亡,TranswellTM实验检测HS746T细胞的侵袭能力,qPCR及Westem blot实验检测凋亡相关蛋白caspase3、caspase9和Bax以及周期相关蛋白P21表达水平;荧光素酶活性分析实验检测Tiam1是miR-10a的作用靶点.已构建的Tiam1高表达的Tiam1-pcDNA3.1质粒和敲除Tiam1基因的PX458质粒分别转染HS746T细胞,通过流式细胞术及TranswellTM实验检测HS746T细胞的凋亡及侵袭能力.结果:与胃上皮组织细胞相比,早期胃癌临床组织细胞中miR-10a表达降低,Tiam1的mRNA及蛋白表达升高;miR-10a的表达与早期胃癌患者的肿瘤转移密切相关,与年龄、性别和肿瘤分期无关;与正常胃粘膜细胞RGM-1和NGEC相比,胃癌细胞HS746T中的miR-10a表达降低,而Tiam1蛋白表达升高;miR-10a可抑制HS746T细胞侵袭,促进细胞凋亡,使其停滞于G0/G1期;miR-10a靶向作用于Tiam1基因的3'非翻译区(YUTR),减少Tiam1的蛋白表达;Tiam1可抑制HS746T细胞凋亡,促进HS746T细胞侵袭.结论:miR-10a靶向作用于Tiam1基因的YUTR,抑制HS746T细胞的增殖及侵袭,促进HS746T细胞凋亡.