体外负压培养对小鼠骨髓间充质干细胞增殖能力和血管内皮生长因子分泌水平的影响

• 作者: 吴向未 周青 姜慧娇 廖振宇 张宏伟 李林林 杨雄峰 王小义 郭黎姣 陈雪玲 雷振 韩欢欢
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 负压培养 细胞增殖 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体 克隆形成单位
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 骨髓干细胞
• 页码范围: 33-39
• 页数: 7页
• 分类号: R459.9|R394.2|R318
• 字数: 9415字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2006

摘要

背景:如何增强骨髓间充质干细胞增殖活性使其移植后发挥应有的疗效是目前急需解决的问题.目的:探讨体外负压培养技术对小鼠骨髓间充质干细胞增殖活性及血管内皮生长因子分泌水平的影响.方法:取第3代骨髓间充质干细胞,给予间歇性负压培养(-6.65,-13.3,-26.6 kPa),2 h/次,1次/12 h,对照组在正常条件下培养.培养12,24,36,48,60 h,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,ELISA检测细胞分泌血管内皮生长因子水平,RT-PCR检测血管内皮生长因子受体mRNA表达.根据上述结果,选择一个最佳负压条件和时间(-26.6 kPa,24 h),将骨髓间充质干细胞分为正常对照组、负压组、负压+血管内皮生长因子受体抑制剂Axitinib组,CCK-8法检测细胞增殖情况,EDU试剂盒检测EDU细胞阳性率,结晶紫染色观察细胞集落形成单位.结果与结论:①与对照组比较,3个负压干预组骨髓间充质干细胞显著增殖(P<0.05);②与对照组比较,3个负压干预组细胞分泌血管内皮生长因子水平显著增高(P<0.05),血管内皮生长因子受体mRNA表达显著增高(P<0.05);③经血管内皮生长因子受体抑制剂处理后,细胞增殖吸光度值、克隆形成单位数量及EDU阳性细胞率较负压干预组明显降低;④结果表明,体外负压培养可能通过上调血管内皮生长因子分泌水平促进骨髓间充质干细胞增殖.