家族序列相似性13A基因干扰对人气道上皮细胞凋亡和增殖的影响及与慢性阻塞性肺疾病患者小气道重塑的关系

• 作者: 张锦 朱金源 马莉琼
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 肺疾病,慢性阻塞性 气道重塑 细胞凋亡 细胞增殖 家族序列相似性13A基因
• 年，卷（期）: 2020,（32）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 2481-2487
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112137-20191202-02621

摘要

目的 探讨家族序列相似性13A(FAM13A)基因与慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)小气道重塑的关系,及干扰FAM13A基因表达对人气道上皮细胞(16HBE细胞)凋亡和增殖表型的影响.方法 收集2018年1月至2020年1月宁夏医科大学总医院胸外科因肺部肿瘤或肺大泡行手术治疗的患者74例,根据肺功能和吸烟史分为4组:肺功能正常不吸烟组(正常组,23例)、肺功能正常吸烟组(吸烟组,24例)、慢阻肺不吸烟组(11例)和慢阻肺吸烟组(16例),采用免疫组化检测各组小气道FAM 13A基因表达,并分析其与肺功能气流受限指标的相关性.设计FAM13A基因短片断干扰RNA(shRNA)片段,构建和包装FAM13A基因shRNA慢病毒载体,转染16HBE细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹法检测FAM13A基因表达水平,并筛选最佳shRNA序列.运用流式细胞技术检测细胞凋亡率和细胞增殖标志物Ki-67荧光强度.结果 FAM 13A主要表达于小气道上皮细胞的胞质,慢阻肺不吸烟组和慢阻肺吸烟组小气道上皮细胞FAM 13A吸光度(A)值均高于正常组和吸烟组(0.365±0.026、0.412±0.053比0.113±0.018、0.105±0.009,均P＜0.05),且其与肺功能气流受限指标第一秒用力呼气容积(FEV1)与用力肺活量(FVC)的比值(FEV1/FVC)及FEV1占预计值百分比(FEV1％pre)呈负相关(r=-0.48和r=-0.40,均P＜0.05).成功构建FAM13A基因shRNA慢病毒载体,并在16HBE细胞系上实现FAM13A干扰.转染16HBE细胞后,shRNA的靶标序列2(shRNA-target-2)的FAM13A表达量降低(均P＜0.01);相比于阴性对照组(shRNA-NC),FAM13A shRNA组细胞凋亡率降低(P=0.023),且Ki-67荧光强度也降低(P=0.042).结论 FAM13A基因在慢阻肺小气道上皮细胞中表达增高,且与慢阻肺气流受限相关,FAM 13A基因可能通过影响人气道上皮细胞凋亡和增殖而参与慢阻肺小气道重塑的过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张锦	宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科	45	184	7.0	9.0
2	朱金源	宁夏医科大学总医院重症医学科	7	59	4.0	7.0
3	马莉琼	宁夏医科大学总医院病理科	14	56	3.0	7.0