FBXO7载体构建及其对结直肠癌细胞生物学行为影响的初步探讨

• 作者: 唐月阳 易红 李星枝 王舰梅 龙汉安
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠癌 FBXO7 细胞周期 迁移
• 年，卷（期）: 2020,（17）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2346-2352
• 页数: 7页
• 分类号: R735
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2020.17.007

摘要

目的 通过检测FBXO7在结直肠癌细胞中的表达情况,构建并鉴定GV230?FBXO7表达载体,探究FBXO7基因表达上调对结直肠癌HCT116及SW620细胞生物学行为的影响.方法 利用PCR方法获取FBXO7基因片段并与GV230载体连接,酶切及测序鉴定GV230?FBXO7重组质粒.在结直肠癌细胞HCT116和SW620中分别转染GV230和GV230?FBXO7,利用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测FBXO7的表达情况,CCK?8实验、细胞周期和细胞划痕实验用于检测其对结直肠癌细胞生物学行为的影响.结果 HCT116和SW620细胞株中FBXO7的mRNA和蛋白表达量均明显低于其他结直肠癌细胞株.成功构建重组质粒GV230?FBXO7,并在结直肠癌细胞HCT116及SW620中成功表达.转染GV230?FBXO7质粒明显增强结直肠癌细胞迁移和增殖能力(P<0.05),细胞的G1期比例减少,而S期比例增加.结论 成功构建GV230?FBXO7质粒,高表达FBXO7减少结直肠癌细胞在G1期比例、增加S期比例,明显提高了其增殖及迁移能力.