敲除含α-Arrestin结构域蛋白3对肾癌细胞PI3K/AKT信号通路及增殖能力的影响

• 作者: 凡杰 李维国 穆星宇 蒋立人 陈暮霖
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: ARRDC3 AXL 信号通路 增殖 肾细胞癌
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2401-2405
• 页数: 5页
• 分类号: R-33|R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2020.13.001

摘要

目的:探究敲除含α-Arrestin结构域蛋白3(α-Arrestin-Domain-Containing-3,ARRDC3)对肾透明细胞癌786-O细胞PI3K/AKT信号通路和增殖能力的影响及作用机制.方法:使用Crispr-Cas9技术构建稳定敲除ARRDC3的786-O细胞系;通过免疫印迹检测敲除ARRDC3对AXL蛋白水平的影响;借助免疫沉淀技术研究敲除ARRDC3对AXL泛素化水平的影响;利用免疫印迹、shRNA干扰蛋白表达技术和及构建的敲除ARRDC3细胞检测ARRDC3和AXL表达水平对PI3K/AKT信号通路活性的影响;CCK-8技术检测ARRDC3和AXL表达水平对肾癌细胞增殖能力的影响.结果:与野生型786-O细胞相比,稳定敲除AR-RDC3的786-O细胞内AXL的蛋白水平显著升高.进一步检测细胞内AXL的泛素化水平发现,ARRDC3稳定敲除组细胞内AXL蛋白的泛素化水平显著降低;免疫印迹和CCK-8实验结果显示,敲除ARRDC3会显著增加AXL/PI3K/AKT信号通路磷酸化和细胞增殖能力,而在ARRDC3缺陷细胞内降低AXL蛋白的表达,会导致AXL/PI3K/AKT的活性和细胞增殖能力恢复到与野生型相似的水平.结论:在786-O细胞内敲除ARRDC3可通过降低ARRDC3对AXL的泛素化降解,上调AXL蛋白水平和PI3K/AKT信号通路的活性,并促进肾癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凡杰	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	28	228	7.0	14.0
2	李维国	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	10	173	6.0	10.0
3	陈暮霖	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	1	0	0.0	0.0
4	穆星宇	上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科	1	0	0.0	0.0
5	蒋立人	上海交通大学附属第一人民医院病理科	1	0	0.0	0.0