穿心莲内酯通过Hippo通路调控伊立替康对结肠癌HT-29细胞凋亡及TOPO-1表达影响

• 作者: 于剑 周怡婷 姜媛 李佳锜 礼巍 臧玉强
• 来源期刊: 临床军医杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 穿心莲内酯 伊立替康 Hippo通路 合成致死
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 临床报道
• 页码范围: 1332-1334,1337
• 页数: 4页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16680/j.1671-3826.2020.11.25

摘要

目的 探讨穿心莲内酯及伊立替康对结肠癌细胞的联合致死作用,寻找低毒高效治疗结肠癌的方法.方法 运用二代测序技术,检测穿心莲内酯对结肠癌细胞作用的基因组学改变情况;运用KEGG及GO进行功能学富集;根据测序结果于TCGA数据库比对穿心莲内酯作用靶点;MTT法检测细胞增殖情况;运用免疫荧光素法检测HT-29细胞TOPO-1活性;Western Blot法检测Bax、BCL-2、YAP-1、TOPO-1表达.结果 穿心莲20μmol/L处理24 h后提取DNA,DNA质检合格后Hiseq测序,基于参考基因组比对,进行可变剪接预测分析以及新转录本的发掘,发掘新转录本60722个.测序结果GO及KEGG富集,提示穿心莲内酯调控Hippo通路.TCGA数据库比对,Hippo通路关键基因YAP1表达与TOPO-1表达呈正相关(r=0.45,P=3.6e-15).MTT法提示穿心莲内酯与SN-38(伊立替康体内活性物质)具有合成致死作用.Western Blot法检测YAP、TOPO-1、BCL-2表达下调,同时促凋亡Bax升高.免疫荧光法提示穿心莲内酯联合SN-38能显著降低TOPO-1活性.结论 穿心莲内酯及TOPO-1抑制剂作为治疗策略的组合疗法,可以提高药物效率以及结肠癌细胞对Hippo通路驱动的癌症中化疗的敏感性,为穿心莲内酯临床运用提供基础理论.