罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

• 作者: 司小萌 张朔 梁玉柱 王铭 郭培霞 陈欢
• 来源期刊: 安徽医药
• 关键词: 骨肉瘤 罗哌卡因 细胞周期蛋白D1 基因,bcl-1 miR-199b-5p 细胞增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 药学研究
• 页码范围: 2347-2351
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-6469.2020.12.004

摘要

目的 探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 体外培养骨肉瘤细胞MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、anti-miR-NC组、anti-miR-199b-5p组、中剂量罗哌卡因+miR-199b-5p组和中剂量罗哌卡因+miR-NC组.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-199b-5p表达水平.结果 与对照组比较,低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组MG63细胞增殖能力[(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)]、Cyclin D1蛋白[(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)]表达降低(P<0.05),而P21[(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)]蛋白表达升高(P<0.05),中剂量罗哌卡因组Bcl-2蛋白[(0.20±0.02)比(0.76±0.07)]及miR-199b-5p[(0.13±0.01)比(0.82±0.08)]的表达降低(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(23.51±2.42)％比(7.66±0.75)％]和Bax蛋白[(0.89±0.09)比(0.28±0.03)]表达升高(P<0.05).与anti-miR-NC组比较,anti-miR-199b-5p组MG63细胞增殖能力[(0.64±0.06)比(0.98±0.09)]及Cyclin D1蛋白[(0.40±0.04)比(0.95±0.09)]和Bcl-2蛋白[(0.36±0.03)比(0.76±0.07)]的表达降低(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(19.56±1.58)％比(7.66±0.75)％]及P21[(0.53±0.05)比(0.14±0.01)]和Bax[(0.71±0.07)比(0.28±0.03)]的蛋白表达升高(P<0.05).与中剂量罗哌卡因+miR-NC组比较,中剂量罗哌卡因+miR-199b-5p组MG63细胞增殖能力[(0.58±0.06)比(0.36±0.03)]及Cyclin D1蛋白[(0.71±0.07)比(0.40±0.04)]和Bcl-2蛋白[(0.53±0.05)比(0.21±0.02)]的表达升高(P<0.05),而MG63细胞凋亡率[(12.68±1.23)％比(23.35±2.34)％]及P21[(0.37±0.03)比(0.72±0.07)]和Bax[(0.57±0.06)比(0.88±0.09)]的蛋白表达降低(P<0.05).结论 罗哌卡因可能通过下调miR-199b-5p降低了骨肉瘤细胞的增殖,并促进了其凋亡.