来源于Paenibacillus campinasensis SK13.001的β-环糊精葡萄糖基转移酶在大肠杆菌中的表达和反应条件优化

• 作者: 姚小琳 张涛 江波
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 大肠杆菌 环糊精葡萄糖基转移酶 异源表达 酶反应
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 生产与科研应用
• 页码范围: 153-157,165
• 页数: 6页
• 字数: 4807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023621

摘要

以1株来源于Paenibacillus campinasensis SK13.001的基因组为模板,通过PCR扩增获得编码β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-cyclodextrin glycosyltransferase,β-CGTase)的基因.将该基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET-22b(+)中,转化Escherichia coli BL21(DE3),经过摇瓶发酵,得到该酶的环化活力为15 U/mL;通过单因素实验对该酶转化淀粉生产环糊精的反应条件进行优化.结果表明,当底物为质量浓度30 g/L的玉米淀粉,反应液pH值为7.0的磷酸盐缓冲液,温度55℃,加酶量5 U/g干淀粉,反应时间8 h,环糊精的转化率达到45.63％,3种环糊精的质量比为α:β:γ=7:75:18.通过对该酶反应的工艺条件进行优化,为环糊精的工业化生产提供参考.