抗人妊娠相关血浆蛋白A单抗的制备、鉴定及化学发光和胶体金检测体系的建立

• 作者: 于洋 张兰兰 曹领改 魏德强
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人妊娠相关血浆蛋白A 单克隆抗体 化学发光法 免疫胶体金
• 年，卷（期）: 2020,（22）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 2753-2758
• 页数: 6页
• 分类号: R737.25|R392.1|Q813.2|R446.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.22.013

摘要

目的:构建抗人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)单抗细胞株,成功筛选配对抗体后建立PAPP-A双抗体夹心化学发光(CLIA)及免疫胶体金(ICG)检测方法.方法:采用杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗PAPP-A单抗的细胞株,将细胞株扩大培养并亲和纯化上清液获得抗体,测定抗体纯度、效价、特异性、表位,建立双抗体夹心CLIA及胶体金体系,并对各体系进行灵敏度、特异性等分析性能评估.结果:获得抗人PAPP-A的杂交瘤细胞株(#13-2-2、#20-1-1、#21-1-1、#44-1-1和#53-2-1).其分泌的抗体效价均大于10-8 g/ml.化学发光体系在0～10000 ng/ml范围内线性关系良好,其准确度的回收率为107.2％;灵敏度为9.56 ng/ml;线性相关系数为0.9966;低高值的变异系数(CV)均小于10％;胶体金体系灵敏度不小于50 ng/ml.两种检测方法与人甲胎蛋白(AFP)、人泌乳素(PRL)、人胎盘催乳素(hPL)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)均不存在交叉.结论:本研究成功制备了抗人PAPP-A单抗,建立了检测PAPP-A化学发光及免疫胶体金体系.该体系为PAPP-A的定量检测和产前诊断等临床应用提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于洋		42	186	8.0	12.0
2	魏德强		10	22	3.0	4.0
3	张兰兰		9	26	4.0	4.0
4	曹领改		6	24	3.0	4.0