摘要:
目的 探讨槲皮素联合si-FSCN1对胃癌MKN45细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法 以0、10,20,40,80和160μmol·L-1槲皮素作用于体外培养的MKN45细胞24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率并计算出槲皮素的半抑制浓度.将si-FSCN1和si-NC分别转染至MKN45细胞,分别命名为si-FSCN1组和si-NC组,未经转染的细胞作为空白组,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测转染效果.以80μmol·L-1槲皮素处理转染si-FSCN1和si-NC的MKN45细胞,分别命名为槲皮素+si-FSCN1组和槲皮素+si-NC组,用噻唑蓝和克隆形成实验检测si-FSCN1组、si-NC组、槲皮素+si-FSCN1组和槲皮素+si-NC组细胞增殖,用Transwell小室实验检测细胞侵袭,用膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡,用Western blot检测细胞中无翅基因(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、生存素(Survivin)蛋白的表达情况.结果 槲皮素的半抑制浓度为85.60μmol·L-1.si-NC组、si-FSCN1组、槲皮素+si-NC和槲皮素+si-FSCN1组细胞的存活率分别为(100.00±10.11)%,(51.72±3.28)%,(66.55±3.46)%和(38.95±2.35)%;克隆形成率分别为(36.48±4.05)%,(21.62±2.36)%,(28.81±2.42)% 和(15.54±1.38)%,细胞凋亡率分别为(3.16±1.55)%,(20.28±3.05)%,(15.87±2.32)%和(33.45±3.28)%;侵袭细胞数分别为(88.85±6.28),(55.00±3.25),(62.68±4.52)和(36.76±3.02)个;β-catenin蛋白相对表达量分别为0.76±0.05,0.42±0.03,0.55±0.04和0.26±0.02;CyclinD1蛋白相对表达量分别为1.21±0.22,0.72±0.06,0.84±0.06和0.32±0.03;MMP-9蛋白相对表达量分别为0.95±0.07,0.66±0.04,0.80±0.05和0.41±0.03;VEGF蛋白相对表达量分别为1.42±0.25,0.84±0.06,0.98±0.06和0.67±0.04;Survivin蛋白相对表达量分别为1.33±0.17,0.90±0.08,1.10±0.06和0.58±0.04.si-FSCN1、槲皮素+si-NC和槲皮素+si-FSCN1组分别与si-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且槲皮素+si-FSCN1组中各指标变化幅度明显大于si-FSCN1或槲皮素+si-NC组.结论槲皮素和si-FSCN1联合可协同抑制MKN45细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡,其作用机制可能与共同抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关.