lncRNA HOTAIR对肝癌细胞HCCLM3放射敏感性的影响

• 作者: 李彩霞 杜贤荣 翟金俊
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: HOX转录反义RNA 肝细胞癌 放射敏感性 微小RNA761
• 年，卷（期）: 2020,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1419-1425
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112137-20191215-02738

摘要

目的 探讨下调长链非编码RNA (lncRNA) HOX转录反义RNA (HOTAIR)靶向微小RNA761 (miR-761)对肝癌细胞HCCLM3放射敏感性的影响.方法 实时荧光定量PCR测定HOTAIR在肝癌细胞HuH-7、SNU-449、HCCLM3和正常肝细胞L-02中的表达差异.HCCLM3细胞分成空白对照、Sh-NC(转染shRNA阴性对照)、Sh-HOTAIR(转染HOTAIR shRNA)、RAD+Sh-NC(转染shRNA阴性对照并经8Gy剂量照射)、RAD+Sh-HOTAIR(转染HOTAIR shRNA并经8Gy剂量照射),流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、C-Caspase-3蛋白表达.Sh-NC、Sh-HOTAIR细胞经过0、2、4、6、8 Gy照射处理,平板克隆实验测定放射敏感性.生物信息学软件预测miR-761可能为HOTAIR的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.将miR-761抑制物、HOTAIR shRNA以及抑制物阴性对照、HOTAIR shRNA分别共转染到HCCLM3细胞中,同样使用上述方法测定细胞凋亡和Bax、C-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3蛋白表达和细胞存活分数.结果 肝癌细胞HuH-7、SNU-449、HCCLM3中HOTAIR表达水平均高于正常肝细胞L-02(1.85±0.12、2.27±0.23、2.68±0.15比1.00±0.09,均P＜0.05).与Sh-NC比较,Sh-HOTAIR、RAD+Sh-NC细胞凋亡率和Bax、C-Caspase-3蛋白水平较高[凋亡率:(13.47±1.32)％、(12.84±1.19)％比(2.98±0.27)％;Bax蛋白:0.74±0.08、0.72±0.06比0.42±0.06;C-Caspase-3蛋白:0.56±0.06、0.54±0.08比0.25±0.04;均P＜0.05].与Sh-HOTAIR、RAD+Sh-NC比较,RAD+Sh-HOTAIR细胞凋亡率和Bax、C-Caspase-3蛋白水平较高[凋亡率:(22.57±2.36)％比(13.47±1.32)％、(12.84±1.19)％;Bax蛋白:0.99±0.11比0.74±0.08、0.72±0.06;C-Caspase-3蛋白:1.03±0.12比0.56±0.06、0.54±0.08;均P＜0.05].与Sh-NC比较,Sh-HOTAIR细胞存活分数较低,细胞放射敏感性较高(P＜0.05).HOTAIR靶向负调控miR-761表达.与共转染抑制物阴性对照、HOTAIRshRNA的细胞比较,共转染miR-761抑制物、HOTAIR shRNA的细胞经过放射处理后,细胞凋亡率较低[(10.24±1.32)％比(21.84±2.01)％],细胞中Bax(0.50±0.06比1.01±0.10)、C-Caspase-3蛋白(0.56±0.07比1.05±0.14)表达较低,细胞存活分数较高(均P＜0.05).结论 下调lncRNA HOTAIR靶向miR-761增加肝癌细胞HCCLM3放射敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟金俊	山西省人民医院急诊科	18	33	4.0	4.0
2	杜贤荣	山西省人民医院肿瘤科	6	8	2.0	2.0
3	李彩霞	山西省人民医院急诊科	18	33	4.0	5.0