重组大肠杆菌产乙酰乳酸合成酶发酵条件优化

• 作者: 刘君 袁思棋 赵婷 金紫阳 黄礼清
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 双乙酰 乙酰乳酸合成酶 大肠杆菌 响应面
• 年，卷（期）: 2020,（14）
• 所属期刊栏目: 生产与科研应用
• 页码范围: 156-162
• 页数: 7页
• 字数: 6339字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023567

摘要

为了提高来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthetase,ALS)的产酶水平,将含有目的基因的重组质粒pEGX-6p-1-als S,转化到E.coli BL21(DE3)进行异源表达,并对重组alsS的发酵条件进行优化.发酵结果显示,优化的发酵培养基成分包括葡萄糖12 g/L、蛋白胨10 g/L、柠檬酸钠5 g/L、KH2 PO43 g/L、MgSO4·7H2 O 1 g/L和NaCl 2 g/L;在优化的培养基中,最佳诱导条件为诱导温度30℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度0.4 mmol/L,诱导时间10 h.通过响应面预测发现,最佳产酶水平条件为pH 7.0、温度30.2℃,IPTG浓度为0.42 mmol/L.经发酵试验验证,该条件下产酶水平达到242.567 U/mL.基于以上所有优化条件,单位菌体(干重)产乙酰乳酸合成酶量达164.299 kU/g,产酶水平达266.657 U/mL,分别是LB培养基的1.31和1.77倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘君	四川轻化工大学生物工程学院	11	57	4.0	7.0
4	赵婷	四川轻化工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
5	黄礼清	四川轻化工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
6	金紫阳	四川轻化工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
7	袁思棋	四川轻化工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0