蔗糖磷酸化酶的半理性设计及生产α-熊果苷的条件优化

• 作者: 刘龙 吕雪芹 堵国成 李江华 林璐 沈洋
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 蔗糖磷酸化酶 α-熊果苷 定点饱和突变 全细胞催化
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 字数: 5366字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023866

摘要

α-熊果苷是一种高价值糖苷,在化妆品和制药行业具有广泛的应用前景.酶法是生产α-熊果苷的主要手段,但由于缺乏高催化效率的酶而限制了α-熊果苷的生产.为了提高来自Streptococcus mutans UA159的蔗糖磷酸化酶(SmSP)的生物转化效率,进而提高α-熊果苷的产量,筛选了4种在Bacillus subtilis WB600中表达SmSP的载体,其中重组质粒pP43NMK-P43-gtfA在全细胞转化20 h后获得了最高的α-熊果苷产量(40.2 g/L).其次,对SmSP催化活性中心周围的loop A进行了定点饱和突变,以提高酶和受体之间的亲和力,得到了突变体SmS-PI336L,其α-熊果苷产量和底物对苯二酚(hydroquinone,HQ)摩尔转化率分别为71.7 g/L和72.4％,产量相比对照提高了78.4％.最后,对重组菌株B.subtilis WB600/pP43NMK-P43-SmSPI336L全细胞转化合成α-熊果苷反应条件进行优化,α-熊果苷的产量达到了110.3 g/L,HQ摩尔转化率为88.7％,产量相比对照提高了2.74倍.高催化效率重组菌株的构建,以及对突变体动力学的分析,对生物转化合成α-熊果苷具有重要的研究意义和应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	堵国成		339	3648	30.0	42.0
2	李江华		78	362	10.0	15.0
3	刘龙		48	153	6.0	10.0
4	沈洋		6	3	1.0	1.0
5	吕雪芹		2	0	0.0	0.0
6	林璐		3	0	0.0	0.0