谷氨酰胺转氨酶活化蛋白酶在大肠杆菌中的表达及性质研究

• 作者: 刘松 高慧
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 谷氨酰胺转氨酶 活化蛋白酶 大肠杆菌 表达优化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 字数: 4543字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023938

摘要

茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)活化蛋白酶(activating metalloprotease,TAMEP)能够专一性切割TGase的酶原区,其高效制备对于重组TGase的生产有重要意义.将S.mobaraensis来源的TAMEP成功表达于大肠杆菌.通过对信号肽类型、信号肽N端密码子及诱导表达条件的优化,使胞外TAMEP酶活力达到186.3 U/mL.酶学性质分析显示,重组TAMEP的最适反应温度和最适反应pH分别为55℃和7.0;TAMEP在30～50℃孵育60 min酶活力保持在50％以上,且在pH 6.2～8.9较稳定;0.133μmol/L重组TAMEP能够在30 min内使6.91μmol/L TGase基本活化.研究结果为TAMEP规模化制备提供了生产菌株和基础数据.