重组人Ⅲ型胶原蛋白的分离纯化

• 作者: 刘冬 单旭东 吕自力 张仁怀 梁波 梁鑫 艾华伟 陈浩然
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 毕赤酵母 重组人Ⅲ型胶原蛋白 盐析 阳离子交换层析
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 生产与科研应用
• 页码范围: 159-163
• 页数: 5页
• 字数: 2758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023967

摘要

利用分泌表达重组人Ⅲ型胶原蛋白的毕赤酵母发酵液,通过层析条件的优化,建立了重组人Ⅲ型胶原蛋白一步层析纯化工艺.发酵液以硫酸铵(30％饱和度)沉淀胶原蛋白,沉淀用超纯水复溶后超滤转换介质至20 mmol/L磷酸缓冲液(phosphate buffer,PB)(pH 6.0),然后用SP Sepharose HP阳离子交换柱进行纯化,以20 mmol/L PB(pH 6.0)-150 mmol/L NaCl洗涤杂蛋白,以20 mmol/L PB(pH 6.0)-250 mmol/L NaCl洗脱重组人Ⅲ型胶原蛋白.采用该工艺对60 L发酵液进行重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化,产品纯度97.7％,总回收率68.8％,纯化的重组人Ⅲ型胶原蛋白纯度高,热原含量低,可用于医药领域.该研究建立了一步层析法从毕赤酵母发酵液中高效制备重组人Ⅲ型胶原蛋白的纯化工艺,工艺简便、稳定可靠,离子交换层析放大容易,为重组人Ⅲ型胶原蛋白的工业化生产奠定了基础.