摘要:
背景:有研究表明成骨细胞代谢异常也可能是膝骨关节炎中软骨下骨矿化异常的原因.目的:验证地黄梓醇对成骨细胞增殖及药物毒性研究,以及对脂多糖诱导的炎性成骨细胞的抗炎保护作用.方法:①新生SD大鼠成骨细胞进行原代提取、培养、传代,通过观察成骨细胞的形态、碱性磷酸酶染色以及矿化结节染色法(茜红素S法)染色,确定成骨细胞活性及增殖情况;②CCK-8法观察不同质量浓度地黄梓醇(0,1,10,100 mg/L)对成骨细胞活性的影响;③采用不同质量浓度脂多糖(0,10,20,40,80,160 mg/L)诱导胎鼠炎性成骨细胞模型,CCK-8法验证筛选最佳浓度;④实验分为正常组、模型组、低浓度地黄梓醇组、中浓度地黄梓醇组、高浓度地黄梓醇组,各组成骨细胞在80 mg/L脂多糖诱导为炎性成骨细胞后,分别给药8h,CCK-8法观察不同质量浓度地黄梓醇对炎性成骨细胞的影响.实验方案经南京市六合区人民医院医学伦理委员会批准.结果 与结论:①将成骨细胞培养至第4代,经碱性磷酸酶染色后可见阳性细胞胞浆内有灰黑色颗粒,细胞体形态呈不规则形;②地黄梓醇质量浓度低于1 mg/L时,对成骨细胞无明显影响;高于10 mg/L时,地黄梓醇对成骨细胞具有促进其增殖作用且无药物毒性作用(P<0.05);③不同质量浓度脂多糖对成骨细胞均有炎性损害,当其质量浓度高于80 mg/L时,对成骨细胞的炎性损伤呈显著趋势(P<0.01),因此实验选择80 mg/L为最佳损伤浓度;④地黄梓醇质量浓度低于1 mg/L时,对成骨细胞炎性反应无明显保护作用;高于10 mg/L时,对成骨细胞炎性反应能起到明显保护作用(P<0.05);⑤结果说明,地黄梓醇达到一定浓度时对成骨细胞无药毒作用且能促进增殖,对脂多糖诱导的炎性成骨细胞有抗炎保护作用.