褪黑素通过激活典型Wnt/β-catenin信号通路促进许旺细胞迁移

• 作者: 吕建伟 马信龙 马剑雄
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 褪黑素 许旺细胞 因子 通路 细胞迁移 周围神经再生 蛋白 实验
• 年，卷（期）: 2020,（31）
• 所属期刊栏目: 干细胞相关基础实验
• 页码范围: 5030-5037
• 页数: 8页
• 分类号: R453|R363|R364
• 字数: 7639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2138

摘要

背景:褪黑素主要是由松果体分泌的一种神经内分泌激素,能够促进许旺细胞增殖并促进周围神经损伤后再生.目的:探究褪黑素对许旺细胞迁移活性的影响及其相关分子机制.方法:体外培养大鼠许旺细胞RSC96细胞株并鉴定;CCK-8检测褪黑素对许旺细胞增殖活性的影响;采用Transwell细胞迁移小室,观察0,100 nmol/L,1μmol/L,10μmol/L褪黑素作用20 h对许旺细胞迁移活性的影响;采用qRT-PCR和Western-blot检测褪黑素受体1,2在许旺细胞上的表达情况;通过Transwell细胞迁移实验,观察褪黑素受体拮抗剂luzindole或典型Wnt/β-catenin信号通路抑制剂IWR-1对褪黑素促进许旺细胞迁移活性的影响.Western-blot检测褪黑素对许旺细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性的调控作用.结果与结论:①贴壁培养的RSC96细胞具有许旺细胞的典型形态,细胞呈纺锤状或三角形,细胞两极伸出细长的突起;许旺细胞标志物S-100免疫荧光染色阳性;②相较于空白对照组,1,10μmol/L褪黑素能够显著促进许旺细胞迁移,对其产生化学性吸引作用,其中1μmol/L褪黑素作用最显著;③许旺细胞主要表达褪黑素受体1;Transwell细胞迁移实验表明,和单纯褪黑素处理组比较,luzindole和褪黑素共同干预组迁移的细胞数无显著性改变,而IWR-1和褪黑素共同干预组许旺细胞迁移的细胞数显著低于单纯褪黑素处理组(P<0.05);④qRT-PCR和Western-blot结果表明,相较于空白对照组,褪黑素组许旺细胞中P-Lrp6,LEF-1和细胞核β-catenin蛋白表达水平显著上调(P<0.05);⑤单纯褪黑素组和IWR-1+褪黑素组许旺细胞中LEF-1和核β-catenin蛋白表达量均显著高于空白对照组和单纯IWR-1组(P<0.05),表明褪黑素在一定程度上拮抗IWR-1对Wnt/β-catenin信号通路活性的抑制作用;⑥上述数据证实,褪黑素能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进许旺细胞迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马信龙	天津市天津医院骨科	143	1253	18.0	28.0
2	马剑雄	天津市天津医院骨科研究所	32	252	8.0	15.0
3	吕建伟	天津市天津医院骨科	1	0	0.0	0.0