成骨诱导因子Nell-1及Noggin短发卡RNA联合转染脂肪间充质干细胞的促成骨分化能力

• 作者: 丁涛 刘军 刘浩 汤峰林 芮永军 陆淼
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: Nell-1 Noggin 共转染 脂肪间充质干细胞 成骨分化
• 年，卷（期）: 2020,（31）
• 所属期刊栏目: 脂肪干细胞
• 页码范围: 4966-4970
• 页数: 5页
• 分类号: R459.9|R394.2|R318
• 字数: 4664字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2116

摘要

背景:Nell-1在诱导成骨分化和新骨形成中的作用已有报道,但试图通过双基因联合转染起协同成骨作用的研究很少.目的:体外环境下抑制细胞中Noggin基因的同时上调Nell-1基因,观察其对脂肪间充质干细胞成骨分化能力的影响.方法:取健康成年大鼠脂肪组织获取脂肪间充质干细胞.将细胞分为3组,对照组转染空载体病毒Lv-EGFP(增强型绿色荧光蛋白),Nell-1组单纯转染Lv-Nell-1,Nell-1+Noggin shRNA组同时转染Lv-Nell-1和Lv-Noggin shRNA.转染后3,7,14 d,应用实时荧光定量PCR检测Nell-1及成骨相关标志物(Col-Ⅰ、ALP、OCN)的表达,转染后14 d行茜素红染色.结果与结论:①转染后3 d,对照组Nell-1 mRNA相对表达量与Nell-1组比较,差异无显著性意义(P>0.05).与Nell-1+Noggin shRNA组比较,对照组和Nell-1组Nell-1 mRNA表达量偏低,差异均有显著性意义(P<0.05).转染后7,14 d,Nell-1+Noggin shRNA组Nell-1 mRNA相对表达量仍高于对照组和Nell-1组,且Nell-1组高于对照组,两两比较差异均有显著性意义(P<0.05);②转染后3,7,14 d,Nell-1+Noggin shRNA组各成骨基因mRNA相对表达量均显著高于对照组和Nell-1组,且Nell-1组高于对照组,组间比较差异有显著性意义(P<0.05);③转染后14 d,Nell-1+Noggin shRNA组呈现较多细胞聚集形成的结节,Nell-1组钙结节数量少于Nell-1+Noggin shRNA组,对照组未见明显被染色的钙结节;④实验结果表明,Nell-1基因可以促进大鼠脂肪间充质干细胞成骨分化,而干扰Noggin基因会上调Nell-1基因的表达,形成显著的协同成骨分化作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	芮永军	无锡市第九人民医院骨科	84	395	11.0	13.0
2	丁涛	南京医科大学附属无锡人民医院骨科	5	6	1.0	2.0
3	刘军	无锡市第九人民医院骨科	9	52	4.0	7.0
4	刘浩	无锡市第九人民医院骨科	4	10	2.0	3.0
5	汤峰林	南京医科大学附属无锡人民医院骨科	2	0	0.0	0.0
6	陆淼	南京医科大学附属无锡人民医院骨科	2	0	0.0	0.0