源于解淀粉芽孢杆菌酸性木聚糖酶酶学性质的研究

• 作者: 夏瑛 方尚玲 李琴 李良 董孝元 郑亚伦 陈茂彬
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 木聚糖酶 解淀粉芽孢杆菌 耐酸性 酶学性质 克隆表达
• 年，卷（期）: 2020,（24）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 58-65
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.024535

摘要

该文从解淀粉芽孢杆菌中克隆得到木聚糖酶基因,在大肠杆菌中实现高效率的异源性表达,设计响应面实验获得最佳的表达优化条件,得到更高酶活力的产物.利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)溶液对重组菌株BA-TB-1进行诱导表达,对诱导条件进行优化.实验发现该木聚糖酶对酸具有较好的耐受性,在pH值为5.0～6.0时有较高的酶活性.在37℃,pH5.0和pH 5.0～7.0条件下分别培养1 h,测定酶活力,残余酶活性分别保持在68％和50％以上.最后通过响应面法得到最佳的优化条件,在此最优条件下进行诱导表达.预测值和实际值分别为550.139、548.87 U/mL,预测值与实际值相近,说明应用响应面法优化木聚糖酶的表达条件可行,该实验结果为大量生产酸性木聚糖酶奠定了一定的理论基础.