碱解法快速提取菠菜基因组DNA方法的优化

• 作者: 孙稚成 孙兆法 段玉军 程斐
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 菠菜 DNA提取 碱解法 DNA质量评价 分子标记辅助筛选
• 年，卷（期）: 2020,（36）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 79-83
• 页数: 5页
• 分类号: S636.1
• 语种: 中文

摘要

为了优化碱解法提取菠菜基因组DNA的方法,并为大批量育种材料的分子标记筛选奠定基础,本试验以菠菜幼嫩叶片为试材,以PCR扩增效果为主要依据,研究NaOH浓度、水浴温度与方法、吐温20浓度对菠菜DNA提取质量的影响.结果表明:以0.4 mol/LNaOH为提取液研磨后沸水浴1 min提取的菠菜DNA的PCR扩增效果明显好于常温处理.样品不经研磨、可直接用PCR扩增仪99℃、4min代替沸水浴加温并省去离心步骤,此时以0.4 mol/L NaOH+0.5％吐温20为提取液时PCR扩增效果最佳.提取DNA的A260/A230比值较高时PCR扩增效果较好,因此A260/A230比值是评价提取DNA质量的最优指标.本试验优化了碱解法简便快速提取菠菜DNA的技术规程.达到了理想的PCR扩增效果.