蜂毒前溶血肽原基因的改造及其原核表达

• 作者: 郭新军
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜂毒前溶血肽原 蜂毒肽 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 87-90
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2020.16.015

摘要

为进一步探讨利用基因工程技术生产蜂毒肽的方法,根据大肠杆菌密码子偏好性、基因GC含量、合成蛋白加工需求等对蜂毒前溶血肽原基因序列进行改造,并利用人工化学合成方法完成改造后全基因的合成.构建蜂毒前溶血肽原与GST融合表达重组质粒pGEX-4T-1/PPMel,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后分别在20、37℃条件下经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并利用SDS-PAGE和Western Blot对产物进行检测.结果 表明,表达体系成功表达了目的 融合蛋白,在20℃条件下可获得可溶性表达产物,为进一步分离纯化目的 蛋白及获得蜂毒肽提供了基础.