多重实时聚合酶链式反应熔解曲线法同步鉴别蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭

• 作者: 许随根 李家鹏 李金春 陈曦 杨君娜 熊苏玥 黄鑫 乔晓玲 曲超 王守伟
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 鱼类 掺假 多重实时聚合酶链式反应 熔解曲线分析 蓝鳍金枪鱼 裸盖鱼
• 年，卷（期）: 2020,（24）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 259-266
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20200528-353

摘要

为实现鱼类及其制品掺假的快速鉴别,以蓝鳍金枪鱼(Thumus thynnus)线粒体DNA的D-loop区、裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)线粒体DNA的16S rRNA基因及异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum)线粒体DNA的 ND4L基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度(Tm)具有显著性差异的特异性引物,建立一种快速鉴别鱼类及其制品中蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的3重实时聚合酶链式反应熔解曲线分析法,通过引物特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价.结果表明:构建优化的方法具有良好的特异性及灵敏度,单物种DNA检出限为0.001 ng,多物种混合DNA检出限均为0.1 ng,蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的相对检出限分别为0.5％、1％、0.5％,通过对市售样品的检测表明,该方法可用于实际样品掺假的快速鉴别.