实时PCR检测食品中荧光假单胞菌方法的建立

• 作者: 闵可 张政 周雨蕾 侯温甫 王宏勋 周敏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 荧光假单胞菌 实时聚合酶链式反应 gyrB基因
• 年，卷（期）: 2020,（24）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 304-309
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20191018-185

摘要

针对荧光假单胞菌分子检测靶点gyrB基因设计引物和探针,制备标准质粒,绘制标准曲线,建立荧光假单胞菌实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测体系.特异性评价表明该体系能够特异性检测荧光假单胞菌,其他细菌均无检出.灵敏性检测结果表明纯DNA水平灵敏度可达14.3 fg/μL,纯培养物水平上检测灵敏度为3.0× 102 CFU/mL.抗干扰性实验结果表明当加入低浓度背景干扰菌时,对上述体系检测灵敏度没有影响.人工污染样品检测表明适当增菌可检测到荧光假单胞菌,说明TaqMan探针real-time PCR法特异性强、灵敏度高、抗干扰性能力强.