甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE细胞恶性转化过程中细胞凋亡相关lncRNA的筛选及功能研究

• 作者: 马顺鹏 王全凯 王苗 宋佳阳 乌瀚宝栎尔 谢广云 许建宁
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 甲基丙烯酸环氧丙酯 人支气管上皮细胞 细胞恶性转化 细胞凋亡 长链非编码RNA
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2021.01.001

摘要

目的:筛选在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中凋亡相关lncRNA,并探讨其对细胞恶性转化的3个时期细胞凋亡的调控作用.方法:取处于对数生长期的16HBE细胞,二甲基亚砜(DMSO)作为溶剂对照,终浓度为8μg/mL的GMA为处理组,每次染毒72 h,重复染毒3次后,分别进行传代培养.收集GMA染毒组和DMSO对照组的第10、20和30代细胞,基于细胞转化表型鉴定结果,将其分为转化前、中和后期.流式细胞术检测3个时期的细胞凋亡率,lncRNA表达谱芯片筛选3个时期细胞凋亡相关差异表达lncRNAs,生物信息学数据库预测差异lncRNA可能的作用靶基因.实时荧光定量PCR验证筛选出的差异lncRNA相对表达水平.结果:与同时期DMSO对照组相比,第10代GMA染毒组的细胞凋亡率明显升高,第20代GMA染毒组的细胞凋亡率降低(均为P<0.05),第30代GMA染毒组的细胞凋亡率与同时期的DMSO对照组相比差异无统计学意义.芯片筛选结果发现,lncRNA CFLAR-AS1在第10、20和30代分别下调22％、上调244％和下调30％,其可能靶基因CFLAR的mRNA分别上调27％、下调30.6％和下调31％.lncRNA CFLAR-AS1的qPCR验证结果与芯片筛选结果一致,与同时期的DMSO对照组相比,第10、20和30代的GMA染毒组细胞分别下调42％、上调442％和下调9％,其中第10和20代细胞与对照组间的差异具有统计学意义(P<0.05).结论:在GMA诱导16HBE恶性转化过程中,转化前期凋亡率升高,转化中期凋亡率下降,这一时期lncRNA CFLAR-AS1可能发挥抑制细胞凋亡的作用,但其作用机制还有待进一步研究.