全反式维A酸对恶性黑素瘤A375细胞上皮-间质转化相关分子表达的影响

• 作者: 党云 向桂琼 樊卓 耿松梅 郭坤
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 黑色素瘤 上皮-间质转化 钙黏着糖蛋白类 波形蛋白 β连环素 全反式维A酸
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 黑素瘤·论著
• 页码范围: 50-55
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.35541/cjd.20200292

摘要

目的:研究全反式维A酸（ATRA）对人恶性黑素瘤A375细胞中上皮-间质转化（EMT）相关分子表达的影响。方法:用含10 μmol/L ATRA的DMEM培养基和DMEM培养基分别处理A375细胞24和48 h作为ATRA-1组和ATRA-2组、对照1组和对照2组，采用实时定量PCR法检测EMT相关基因上皮钙黏着蛋白、神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达。Western印迹法检测ATRA-1组、ATRA-2组、对照1组中上述蛋白的相对表达量，直接免疫荧光法检测上皮钙黏着蛋白和波形蛋白的荧光强度。统计分析采用两因素方差分析、单因素方差分析及LSD- t检验。 结果:ATRA-1组和ATRA-2组分别与对照1组和对照2组相比，上皮钙黏着蛋白mRNA的表达均显著增加（ F = 13.148、31.529， P < 0.05），而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达均显著降低（均 P < 0.05）；ATRA-2组上皮钙黏着蛋白mRNA的表达显著高于ATRA-1组（ F = 13.148， P < 0.05），而其他3种蛋白mRNA的表达显著低于ATRA-1组（均 P < 0.05）；对照1组与对照2组上述蛋白的mRNA表达差异无统计学意义（均 P > 0.05）。Western印迹法显示，与对照1组相比，ATRA-1组和ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调，而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达均下调（均 P < 0.05）；与ATRA-1组相比，ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调（ P < 0.05），神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达下调（均 P < 0.05）。直接免疫荧光显示，ATRA-1组、ATRA-2组上皮钙黏着蛋白的荧光强度（6.23 ± 0.08、10.37 ± 0.13）显著高于对照1组（2.37 ± 0.14，均 P < 0.05），而波形蛋白的荧光强度（15.17 ± 0.18、10.29 ± 0.03）显著低于对照1组（50.16 ± 0.26，均 P < 0.05），抑制上皮向间质转化。 结论:ATRA可上调A375细胞中上皮钙黏着蛋白的表达，降低神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白的表达，可能抑制A375细胞发生EMT现象。