银离子对细菌整合子捕获耐药性基因盒频率的抑制作用

• 作者: 王健祯 顼小凤 杨泽华
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 整合子 整合频率 银离子 大肠埃希菌 耐药性
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 81-87
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20201115-00522

摘要

目的:讨论银离子对大肠埃希菌BL21(DE3)宿主中第一类整合子整合频率的影响。方法:将pUCINT及pACINAD两种重组质粒依次转化大肠埃希菌BL21(DE3)，命名为HS2。实验组分别使用含0.3 μg/ml、0.6 μg/ml和0.8 μg/ml银离子LB液体培养基，对照组使用普通LB液体培养基，银离子通过硝酸银提供，培养条件为37℃培养24 h。菌株培养完成后均用实时聚合酶链反应(qPCR)测定发生重组反应的整合子拷贝数和总的整合子拷贝数，二者比值即为整合频率。同时通过3次独立表型筛选法分析整合频率变化并利用质谱分析菌株蛋白质表达情况。结果:qPCR测定的对照组HS2菌株的整合频率为1.79×10 -5(1.44×10 -5，3.13×10 -5)，实验组中0.3 μg/ml银离子组整合频率为2.07×10 -5(1.49×10 -5，2.67×10 -5)，0.6 μg/ml银离子组为2.25×10 -6(1.47×10 -6，4.54×10 -6)，0.8 μg/ml银离子组为1.69×10 -6(0.22×10 -6，3.08×10 -6)。实验组中0.6 μg/ml银离子组与0.8 μg/ml银离子组整合频率明显低于对照组，差异具有统计学意义( P<0.01)，但0.3 μg/ml银离子组整合频率与对照组比较差异无统计学意义。3次独立表型筛选法测定结果与qPCR结果一致且质谱分析得出经银离子作用的菌株蛋白质表达存在差异。 结论:一定浓度的银离子对细菌整合子捕获耐药性基因盒频率存在抑制作用。