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摘要:
背景:黏着斑激酶被作为骨组织工程中"生物材料/支架""种子细胞""生长因子"3个要素的桥梁分子,研究其在相关种子细胞成骨分化过程中的作用及机制,对于骨组织工程的发展及应用尤为重要.目的:探讨黏着斑激酶在诱导永生化小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化过程中的作用及机制.方法:在相同的诱导条件下诱导野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化,在相同的诱导条件下诱导经磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂和细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化.在显微镜下观察不同诱导时期细胞形态改变,蛋白免疫印迹技术检测早期成骨相关蛋白表达水平及相应的磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶磷酸化水平,Real-time PCR检测成骨相关基因转录水平,最后在成骨诱导3周后对诱导细胞进行茜素红钙结节染色.结果与结论:①相同的诱导条件下黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞的成骨效应较保留斑激酶的小鼠胚胎成纤维细胞组明显下降;②加入磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;③加入细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;④提示静默黏着斑激酶表达可通过降低磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶(1/2)磷酸化水平,降低成骨相关蛋白表达水平,进而抑制小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化.
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文献信息
篇名 黏着斑激酶诱导小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化的作用及机制
来源期刊 中国组织工程研究 学科 医学
关键词 黏着斑激酶 永生化 小鼠 胚胎 成纤维细胞 细胞外调节蛋白激酶 成骨分化
年,卷(期) 2021,(2) 所属期刊栏目 骨组织构建
研究方向 页码范围 165-171
页数 7页 分类号 R459.9|R318|Q254
字数 8474字 语种 中文
DOI
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1 黄永辉 91 576 13.0 20.0
2 孙继芾 24 126 6.0 10.0
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中国组织工程研究
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2095-4344
21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
8-584
1997
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