DNA甲基化调控对男性不育的影响及其作用机制

• 作者: 杜鹏 张晓丽 赵晓勇
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 表观遗传学 DNA甲基化 男性不育
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 临床研究|Clinical Research
• 页码范围: 10-16
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2021.01.002

摘要

目的 探讨表观遗传学调控对男性不育的影响及作用机制.方法 选择2020年2月至12月于广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科门诊就诊患者作为研究对象,分为对照组(50例)及不育组(50例).收集精液标本,采用Real time-PCR和Western blot检测DNMT1、ERp29、PTEN、TSC2 mRNA和蛋白表达,采用甲基化DNA免疫共沉淀测序(MeDIP-Seq)检测甲基化差异显著的基因.采用GC1、GC2、TM4精子细胞株,分为空白对照组(Con组)、ERp29沉默组(shERp29组)、ERp29过表达组(ERp29OE组).去甲基药物(5-AZA-DC)处理后进行甲基化特异性PCR(MSP)、细胞增殖、凋亡能力检测.结果 与对照组相比,不育组患者DNMT1 mRNA[5.25±1.12 vs 8.22±0.67,P<0.05]和蛋白[3.33±0.98 vs 7.31±0.55,P<0.01]表达上调,差异具有统计学意义;ERp29 mRNA[5.17±0.98 vs 2.27±0.33,P<0.05]和蛋白[6.12±1.03 vs 2.59±0.43,P<0.05]、PTEN mRNA[4.58±0.77 vs 1.97±0.28,P<0.05]和蛋白[6.21±1.04 vs 2.28±0.36,P<0.05]、TSC2 mRNA[6.39±0.83 vs 3.16±0.52,P<0.05]和蛋白[6.56±0.67 vs 3.03±0.17,P<0.05]表达下调,差异具有统计学意义.MeDIP-Seq结果显示,不育组中ERp29、PTEN和TSC2启动子区域甲基化水平差异显著,有统计学意义(P<0.05).MSP证实GC1细胞株PTEN基因启动子区CpG岛DNA甲基化,5-AZA-DC干预前shERp29、ERp29OE组甲基化上升,干预后shERp29、ERp29OE组甲基化下降.GC1、GC2、TM4细胞株5-AZA-DC干预后shERp29和ERp29OE组增殖上调,凋亡下降,差异有统计学意义(P<0.05),Con组无统计学意义(P>0.05).结论 ERp29是引起男性不育发病的重要基因,可作为男性不育表观遗传学治疗的潜在靶点.