miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

• 作者: 周超 温天明 胥丽 刘杰 邬昊 李钊
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 脓毒症 免疫抑制 miR-140 PD-L1
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 10-15
• 页数: 6页
• 分类号: R459.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2021.01.003

摘要

目的 探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用.方法 取90只小鼠随机分成对照组(Control组)、脓毒症模型组(CLP组)和CLP+miR-140组,每组30只.盲肠结扎穿孔法(CLP法)建立小鼠脓毒症模型,尾静脉注射转染miR-140 agomir,记录30天生存率,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-a)、白细胞介素2(IL-2)表达,流式细胞术检测血清CD4+T和CD8+T细胞百分率,提取腹膜巨噬细胞,流式细胞术分析PD-L1阳性百分率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-140和PD-L1基因表达,蛋白印迹(Western blot)检测PD-L1蛋白表达,荧光素酶报告实验检测miR-140和PD-Ll靶向作用关系.结果 与control组相比,CLP组在1、7、14 d的TNF-a、IL-2水平升高(P＜0.01),而TNF-a、IL-2水平呈时间依赖性降低(P＜0.05);CLP组较control组小鼠生存率降低(P＜0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P＜0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率升高(P＜0.01),miR-140表达水平降低(P＜0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平升高(P＜0.01);与CLP组比较,CLP+miR-140组小鼠生存率升高(P＜0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P＜0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率下降(P＜0.01),miR-140表达水平升高(P＜0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平降低(P＜0.01);荧光素酶报告实验结果显示miR-140和PD-L1存在靶向作用关系.结论 miR-140可靶向作用于PD-L1,从而改善小鼠脓毒症引起的免疫抑制.