轮状病毒LLR株培养条件的优化

• 作者: 庞兴 马金霞 刘淦 张永鹏 魏邦孝 郭敏 李佳林 鱼轲
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 关键词: 牛肾细胞 轮状病毒LLR株 感染复数 胰蛋白酶浓度 pH 病毒滴度
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2021.03.006

摘要

目的 为提高轮状病毒滴度,对病毒培养过程中的关键因素如感染复数(multiplicity of infection,MOI)、胰蛋白酶浓度及维持液pH进行优化,为口服轮状病毒活疫苗生产提供数据依据.方法 将轮状病毒LLR株分别以MOI 0.005、0.01、0.02、0.04和0.08接种牛肾细胞后收获病毒;以MOI 0.02接种牛肾细胞,分别加入含1、2、3、4、5和7 μg/mL胰蛋白酶的MEM培养液后收获病毒;以MOI 0.02接种牛肾细胞,分别加入pH为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0及8.5的MEM培养液后收获病毒.分别在24、48、72及96 h取样,检测病毒滴度.结果 以MOI 0.02接种牛肾细胞后滴度最高,为7.5 lgCCID5o/mL;当维持液中胰蛋白酶质量浓度为4μg/mL时滴度最高,为7.2 lgCCID5o/mL;当pH为6.5及7.0时滴度最高,均为7.5 lgCCID5o/mL.结论 通过对牛肾细胞培养轮状病毒关键条件的优化,获得了提高病毒滴度的有效方法,为口服轮状病毒活疫苗生产过程控制提供数据依据.