飞燕草素对光化学损伤661W细胞的保护作用及其机制

• 作者: 邓晓敏 傅晓颖 彭佳媛 吴蔼林 李沁轩 杜旌畅 陈玮 朱彦锋 余小平
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 飞燕草素 661W细胞 光化学损伤 氧化应激 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 120-124
• 页数: 5页
• 分类号: R774
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨飞燕草素对光化学损伤661W细胞的保护作用及其机制.方法 取661W细胞进行培养,根据预实验结果采用(2000±200)lux光照强度持续照射细胞48 h作为造模条件,采用5 μmol·L-1飞燕草素、3 mmol·L-1抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为最佳用药浓度.细胞分组如下:对照组,常规避光培养48 h;光照组,(2000±200)lux光照培养48 h;光照飞燕草素组,(2000±200)lux光照培养24 h,换含5 μmol.L-1飞燕草素的培养基继续光照培养24 h;避光飞燕草素组,避光培养24 h,换含5 μmol·L-1飞燕草素的培养基继续避光培养24 h;光照NAC组,(2000±200)lux光照培养24 h,换含3 mmol·L-1 NAC的培养基继续光照培养24 h.采用显微镜观察各组细胞状态、CCK-8 检测细胞生存率、DCFH-DA荧光探针染色检测细胞活性氧(ROS)水平、JC-10 染色检测线粒体膜电位、Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率、Western blot检测氧化应激线粒体凋亡通路相关蛋白表达水平.结果 显微镜下可见,对照组细胞生长状态良好;光照组细胞皱缩卷曲,脱落细胞增加.CCK-8检测结果显示:与对照组相比,光照组细胞生存率均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);避光飞燕草素组细胞生存率无明显变化(P＞0.05).与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NA C组和避光飞燕草素组细胞生存率均明显回升,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).与对照组相比,光照组ROS含量均明显上升,差异有统计学意义(P＜0.05);避光飞燕草素组RO S含量减少不明显,差异无统计学意义(P＞0.05).与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组ROS含量均明显下降,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).与对照组相比,光照组线粒体膜电位均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);避光飞燕草素组线粒体膜电位变化不明显,差异无统计学意义(P＞0.05).与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组线粒体膜电位明显上升,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组细胞凋亡率均明显降低,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组的iNOS、Bax、细胞色素C、Cleaved-Caspase-3蛋白表达均下调,Bcl-2蛋白表达均上调,Bcl-2/Bax值均明显上升,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 飞燕草素可通过调节氧化应激线粒体凋亡通路相关蛋白表达,对光化学损伤661W细胞产生保护作用.