米诺环素对碱烧伤大鼠角膜新生血管生成的影响及其作用机制

• 作者: 石琛 肖启国 王智 刘翀 张亚兰 刘明之
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 米诺环素 巨噬细胞极化 碱烧伤 角膜新生血管
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 136-139
• 页数: 4页
• 分类号: R772.2
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨米诺环素对碱烧伤大鼠角膜新生血管生成的影响及其作用机制.方法 选取SPF级健康SD 大鼠72 只(取右眼为实验眼),从中随机选取24 只(24 眼)作为空白对照组(不做任何干预),其余48 只采用1 mol.L-1 NaOH 浸润过的实验滤纸建立角膜碱烧伤模型,然后随机分为溶剂对照组和米诺环素组,每组24 只(24 眼).溶剂对照组在大鼠角膜碱烧伤后给予9 g·L-1 NaCI溶液(10 mL·kg-1)腹腔注射,米诺环素组在大鼠角膜碱烧伤后给予米诺环素溶液(45 mg·kg-1)腹腔注射.各组于角膜碱烧伤后1 d、4 d、7 d、14 d随机抽取6只大鼠,在裂隙灯下观察眼前节情况,并测量各时间点大鼠角膜新生血管长度及面积.采用HE 染色对角膜炎症细胞计数,实时荧光定量PCR检测角膜组织中一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA 的相对表达量,免疫组织化学染色法分析角膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD206 的表达,对所得数据进行统计学分析.结果 整个实验过程中,空白对照组大鼠角膜透明,无角膜新生血管.碱烧伤后4 d、7 d、14 d,米诺环素组及溶剂对照组均可见角膜新生血管长出,但米诺环素组角膜新生血管长度及面积均小于溶剂对照组,差异均有统计学意义(均为P＜0.01).HE染色发现,空白对照组角膜结构清晰,上皮细胞排列整齐,无血管结构.碱烧伤后4 d、7 d、14 d,溶剂对照组与米诺环素组每个视野(×200)炎症细胞数分别为(119.83±7.28)个、(81.83±8.30)个,(92.50±7.34)个、(42.33±9.11)个,(48.33±7.76)个、(16.67±4.93)个,各时间点两组间比较差异均有统计学意义(均为P＜0.01).与空白对照组相比,碱烧伤后1 d、4 d、7 d、14 d,溶剂对照组iNOS、Arg-1 mRNA相对表达量均升高(均为P＜0.05);与溶剂对照组相比,碱烧伤后4 d、7 d,米诺环素组iNOS mRNA相对表达量均明显减少(均为P＜0.05),而在碱烧伤后1 d、14 d,两组间差异均无统计学意义(均为P＞0.05);与溶剂对照组相比,米诺环素组Arg-1 mRNA 相对表达量在碱烧伤后14 d显著减少(P＜0.01),而在碱烧伤后1 d、4 d、7 d,两组间差异均无统计学意义(均为P＞0.05).溶剂对照组碱烧伤后4 d、7 d、14 d,Arg-1 和iNOS mRNA 相对表达量比值分别为0.73±0.14、0.82±0.90、1.71±0.21,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均为P＜0.01).溶剂对照组Arg-1 mRNA相对表达量与角膜新生血管长度和面积之间均呈显著正相关,相关系数分别为0.898(P = 0.000)、0.781(P = 0.000).碱烧伤后7 d、14 d,溶剂对照组 TNF-α、CD206蛋白表达的累积光密度值均高于米诺环素组(均为P＜0.05).结论 巨噬细胞极化调控角膜碱烧伤后新生血管的生成,米诺环素可能通过调控巨噬细胞极化,减轻碱烧伤后角膜新生血管生成.