毛蕊花糖苷通过下调TGF-β抑制胶质母细胞瘤上皮间质转化的实验研究

• 作者: 张时真 王业忠 钱程 肖仕印
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 关键词: 胶质母细胞瘤 毛蕊花糖苷 上皮间质转化 迁移 侵袭 转化生长因子-β
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 40-48
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115354-20200701-00524

摘要

目的:探讨毛蕊花糖苷(VB)对胶质母细胞瘤细胞上皮间质转化的作用及分子机制。方法:(1)实验1：常规培养胶质母细胞瘤T98和U251细胞并各自分为4组，依次添加0、20、40、80 μmol/L的VB处理24 h。采用CCK-8实验检测4组细胞存活率；采用Transwell实验检测4组细胞迁移、侵袭情况；采用RT-PCR实验及Western blotting实验检测4组细胞转化生长因子-β(TGF-β)、波形蛋白、Snail蛋白mRNA及蛋白表达情况。(2)实验2：T98、U251细胞各分为4组，依次为对照组、VB组、TGF-β组和TGF-β+VB组。对照组及VB组细胞转染空载质粒、TGF-β组及TGF-β+VB组细胞转染TGF-β质粒；转染24 h后VB组、TGF-β+VB组细胞均加入40 μmol/L VB继续培养24 h，随后进行后续实验(迁移和侵袭实验、Western blotting实验，实验方法及检测指标同实验1)。(3)体内实验：裸鼠皮下种植U251细胞后分为2组，每组8只。实验组每天腹腔注射100 mg/kg的VB，对照组注射等量的PBS。记录小鼠肿瘤体积大小和小鼠体质量的变化；实验终点(移植后21 d)时，检测小鼠肿瘤重量并采用Western blotting实验检测肿瘤中TGF-β、波形蛋白、Snail的表达。结果:(1)实验1：与0 μmol/L VB组相比较，20 μmol/L、40 μmol/L VB组的细胞存活率差异无统计学意义( P>0.05)，而80 μmol/L VB组细胞存活率下降，差异有统计学意义( P<0.05)；与0 μmol/L VB组比较，20和40 μmol/L VB组迁移和侵袭到下室的细胞随浓度的增高而减少，TGF-β、波形蛋白、Snail蛋白的mRNA和蛋白表达水平也依次降低，差异有统计学意义( P<0.05)。(2)实验2：与对照组相比较，VB组细胞迁移和侵袭的细胞数量减少，TGF-β、波形蛋白及Snail蛋白的表达下调，差异有统计学意义( P<0.05)；而TGF-β组细胞迁移和侵袭的细胞数量增加，TGF-β、波形蛋白及Snail蛋白的表达上调，差异有统计学意义( P<0.05)；与VB组比较，TGF-β组及TGF-β+VB组细胞迁移和侵袭的细胞数量增加，TGF-β、波形蛋白及Snail蛋白的表达上调，差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)体内实验：与对照组相比，实验组小鼠的肿瘤体积和肿瘤重量更小，TGF-β、波形蛋白及Snail蛋白表达量更小，差异均有统计学意义( P<0.05)；但2组小鼠的体质量差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:VB通过下调TGF-β的表达而抑制胶质母细胞瘤的上皮间质转化。