RNA结合蛋白CELF2在小鼠胚胎造血发育中的功能研究

• 作者: 李帅丽 宁小伟 刘兵 周杰
• 来源期刊: 癌症
• 关键词: Celf2 HSC发育 CFU-C AGM区细胞移植
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 原创论著
• 页码范围: 167-174
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

背景 与目的在前期研究中我们发现,RNA结合蛋白CELF2在造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)前体(pre-HSC)阶段高表达.本研究旨在探究Celf2基因敲除是否影响小鼠胚胎造血干/祖细胞(hematopoietic stem progenitor cell,HSPC)的发育.方法 基于单细胞转录组测序数据分析,我们选择Celf2基因作为研究靶标,并利用CRISPR/Cas9技术构建了Celf2基因敲除小鼠模型.以胚胎期(Embryo day,E)第11.5 d(简称E11.5)的Celf2+/+或Celf2+/-小鼠胚胎为对照组,Celf2-/-胚胎为实验组进行实验.对主动脉–性腺–中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区和卵黄囊(yolk sac,YS)细胞进行体外造血细胞集落培养(colony forming units-culture,CFU-C),计数其产生造血集落的种类和数量.将对照组和实验组小鼠AGM区细胞分别移植到致死剂量辐照的受体小鼠,分别在移植后的4周、8周和12周检测供体来源细胞的外周血嵌合情况.结果 与对照组相比,Celf2-/-胚胎AGM及YS区细胞产生造血集落的种类和数量无显著差异(P值分别为0.1065,0.4683).Celf2-/-胚胎和对照组胚胎AGM区移植后,受体的外周血均发生了造血重建.结论 Celf2敲除不影响E11.5时AGM区和YS组织造血干/祖细胞(hematopoietic progenitor cells,HPCs)的数量和功能,且Celf2敲除后AGM区仍能产生功能性的HSC.