血清反应因子经组蛋白乙酰化促进大鼠骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化

• 作者: 刘晶霞 梁志清
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 血清反应因子 分化 组蛋白乙酰化 丁酸钠
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 303-310
• 页数: 8页
• 分类号: R322.74|R329.21|R329.26
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202008213

摘要

目的 探讨血清反应因子(serum response factor,SRF)在大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化为膀胱平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)中的作用和机制.方法 贴壁法分离4周龄雌性SD大鼠的骨髓MSCs与膀胱SMCs,通过Transwell小室共培养诱导MSCs分化.收集MSCs,根据共培养不同时间点进行分组,通过实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测共培养SRF MSCs中SMCs标志基因表达;通过染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)定量PCR技术检测SMCs相关基因启动子区组蛋白乙酰化修饰、组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)和SRF的富集.丁酸钠(sodium butyrate,NaB)预处理MSCs后与SMCs共培养,实验分为正常共培养对照组和NaB预处理干预组,ChIP-qPCR对比两组间组蛋白修饰和SRF富集情况.结果 共培养MSCs中,α-SMA、Calponin和SM-MHC基因表达量增加,在这些基因启动子区H3K9ace,H3ace和H4ace富集量增加(P＜0.05),同时MSCs中HDAC1和HDAC2降低(P＜0.05).与对照组相比,NaB干预组SRF、H3K9ace和H4ace富集量增加(P＜0.05).结论 SRF可能在HDAC1和HDAC2调节下通过结合H3K9ace和H4ace控制SMCs标志基因表达,从而促进MSCs向SMCs的分化.