棉铃虫APN基因家族系统进化与功能分析

• 作者: 牛琳琳 ZAW Lin Naing 张彩虹 EI Thinzar Soe 梁革梅
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 氨肽酶N 棉铃虫 系统进化 功能分析
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 91-101
• 页数: 11页
• 分类号: S433.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2020.05.001

摘要

氨肽酶N(APN)是锌金属蛋白酶M1家族的成员,鳞翅目昆虫中肠刷状缘膜囊泡(brush border membrane vesicles,BBMV)细胞膜上的APN不仅在蛋白消化吸收过程中起着重要的作用,而且是Bt的重要受体蛋白.本研究通过PCR技术克隆得到7条棉铃虫APN基因全长序列,HaAPN1～7(Genbank登录号为MT002819～MT002825).经生物信息学分析,HaAPN1～7全长为2592～3099 bp,编码863～1032个氨基酸,分子量为110～115 kDa,等电点为4.7～6.4,N端信号肽为15～20 aa.系统进化分析结果表明,HaAPN1～7分属于Class 1～7类别.RT?qPCR结果表明,在敏感棉铃虫5龄幼虫中肠中APN2的表达量最高,APN7的表达量最低;Cry1Ac抗性品系棉铃虫中各类APN的表达趋势与敏感品系一致.取食Cry1Ac、Cry2Ab和Vip3Aa蛋白后棉铃虫中肠APN活性显著降低,取食Cry1Ac和Vip3Aa蛋白后中肠液和BBMV中APN活性都显著降低,而取食Cry2Ab蛋白后只有BBMV上APN活性显著降低;棉铃虫对Cry1Ac、Cry2Ab和Vip3Aa产生耐受性后,中肠液和BBMV中APN活性也都发生显著变化.因此,不同类别的棉铃虫APN在Bt的杀虫机制中可能起到不同的作用,APN活性变化可能与Bt蛋白的降解及抗性演化相关.