中华蜜蜂气味结合蛋白AcerOBP14的表达及配体结合特性分析

• 作者: 彭竹 黄丽 赵淑果 吕建华 赵慧婷
• 来源期刊: 昆虫学报
• 关键词: 中华蜜蜂 气味结合蛋白 蛋白纯化 气味化合物 荧光竞争结合实验
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 生理与生化|Physiology and Biochemistry
• 页码范围: 178-186
• 页数: 9页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2021.02.005

摘要

[目的]气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫寄主定位、产卵地选择等行为中发挥着重要作用,明确中华蜜蜂Apis cerana cerana AcerOBP14与配体的结合特性有助于阐明中华蜜蜂嗅觉识别的分子机制.[方法]通过qRT-PCR测定OBP14在20日龄中华蜜蜂成年工蜂、20日龄中华蜜蜂成年雄蜂、中华蜜蜂采粉蜂和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica采粉蜂触角中的表达量.构建原核表达载体pET28a/A4cerOBP14,表达并分离纯化重组蛋白AcerOBP14.利用荧光竞争结合实验检测AcerOBP14与37种气味配体化合物的结合特性.[结果]qRT-PCR分析发现,OBP14在中华蜜蜂采粉蜂触角中的表达量极显著高于20日龄中华蜜蜂成年工蜂和雄蜂以及意大利蜜蜂采粉蜂中的.荧光竞争结合实验表明,AcerOBP14与蜂王信息素、告警信息素、那氏信息素及多种植物挥发物都具有结合能力,其中与β-罗勒烯的结合能力最强,解离常数Ki=0.297 μmol/L.[结论]AcerOBP14的配体结合谱较宽,暗示其可能参与了中华蜜蜂的多种生理行为反应,且在中华蜜蜂的采粉行为中发挥着重要作用.