聚乙二醇化胰高血糖素样肽1类似物生物活性的报告基因法测定

• 作者: 田石华 秦荣浦 江筠 刘敏 张慧颖 李珺 何成
• 来源期刊: 国际生物制品学杂志
• 关键词: 胰高血糖素样肽1 碱性磷酸酶 基因，报告
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 149-152
• 页数: 4页
• 分类号: Q-31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn311962-20200426-00048

摘要

目的:建立检测聚乙二醇化胰高血糖素样肽1类似物(polyethylene glycolylated glucagon-like peptide-1 analogue，PEG-GLP-1a)生物活性的报告基因法，并对该方法进行验证。方法:将人胰高血糖素样肽1受体表达载体和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase, SEAP)报告基因载体瞬时共转染HEK293T细胞，培养后加入PEG-GLP-1a刺激细胞分泌SEAP，使用SEAP报告基因检测试剂盒进行测定，并验证其专属性、准确性、精密度、稳定性等指标。结果:人胰高血糖素样肽1受体和SEAP双载体瞬时共转染的HEK293T细胞对PEG-GLP-1a具有强反应性。使用该方法测定PEG-GLP-1a具有良好的专属性。加标回收率为97.6%～102.2%，准确性较好。不同测定日期的日内半数效应浓度的变异系数均不超过10.22%，不同测定日期的日间半数效应浓度的变异系数均不超过13.02%。结论:报告基因法可以用于PEG-GLP-1a的生物活性检测。