肿瘤坏死因子受体超家族成员4(TNFRSF4)敲除和人源化小鼠模型的建立

• 作者: 黄艺滢 白琳 雷雪裴 李珂雅 李欣悦 侯丽雅 石桂英
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 关键词: 肿瘤坏死因子受体超家族成员4 人源化 基因敲除 小鼠
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 137-144
• 页数: 8页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2021.02.001

摘要

目的 建立肿瘤坏死因子受体超家族成员4(TNFRSF4)基因人源化小鼠模型,同时建立TNFRSF4基因敲除小鼠模型,为针对TNFRSF4靶点的肿瘤治疗性抗体研发和筛选提供有效的小鼠模型,并为研究TNFRSF4在免疫过程中的作用机制提供小鼠模型.方法 利用CRISPR/Cas9技术,建立TNFRSF4基因人源化和敲除小鼠模型,利用PCR、RT-PCR、免疫组织化学、流式细胞术等方法鉴定及比较分析人源化小鼠、敲除小鼠和野生型小鼠的差异.结果 获得表达人源TNFRSF4基因小鼠和TNFRSF4基因敲除小鼠.在TNFRSF4人源化小鼠中稳定表达人源TNFRSF4,未检测到小鼠TNFRSF4表达.在TNFRSF4敲除小鼠中未检测到TNFRSF4表达.TNFRSF4人源化及敲除小鼠出生后6个月内均正常存活,组织病理学表型及免疫系统未见明显异常.结论 利用CRISPR/Cas9技术构建TNFRSF4人源化小鼠及敲除小鼠,可用于筛选及评估与TNFRSF4基因相关的治疗性抗体及药物或研究TNFRSF4在免疫过程中作用机制.