非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较

• 作者: 肖琦 蒋彩霞 史慧 赵霞玲 钱雯娴 朱家平 张冯禧 温立斌 汪伟 何孔旺
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 检测 荧光定量PCR 灵敏性 稳定性 敏感性
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医与水产蚕桑
• 页码范围: 119-124
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2021.02.022

摘要

为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较.以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10～102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies.对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60％～99.03％.其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988～0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之.本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据.