补阳还五汤含药血清对TGF-β1诱导的人肺动脉内皮细胞Dll4/Notch4信号的调控作用

• 作者: 杨邯捷 渠景连 赵惠亮 郭永胜
• 来源期刊: 江苏中医药
• 学科: 医学
• 关键词: 补阳还五汤 特发性肺纤维化 内皮细胞 肺动脉 细胞株 内皮间质转化 新西兰兔 实验研究
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 73-77
• 页数: 5页
• 分类号: R289.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.19844/j.cnki.1672-397X.2021.01.023

摘要

目的:观察补阳还五汤含药血清对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAEC)Dll4/Notch4信号的调控作用.方法:以53.36?g/(kg·d)剂量灌胃家兔,制备补阳还五汤含药血清,等容积生理盐水灌胃制备空白血清.体外培养HPAEC细胞,TGF-β1诱导建立内皮间质转化(EndMT)模型,设立空白组(10％空白血清)、模型组(10％空白血清+TGF-β1)、DAPT组(10％空白血清+DAPT+TGF-β1)、10％含药血清组(10％含药血清+TGF-β1)、5％含药血清组(5％含药血清+5％空白血清+TGF-β1)和2.5％含药血清组(2.5％含药血清+7.5％空白血清+TGF-β1)6组.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1?mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹(Western?blot)法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1蛋白的表达,采用免疫共沉淀(Co-IP)法检测各组HPAEC细胞NICD4与CBF1的相互作用.结果:与空白组比较,模型组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1?mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),且NICD4与CBF1有结合作用;与模型组比较,DAPT组和补阳还五汤各剂量含药血清组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1?mRNA及蛋白表达均降低,NICD4与CBF1的结合被抑制,随着含药血清浓度的增加,作用越明显.结论:补阳还五汤含药血清可抑制TGF-β1诱导的HPAEC细胞的Dll4/Notch4信号,这可能是其干预内皮间质转化的机制之一.