生鲜肉中3种食源性致病菌Taqman多重荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 陈秀琴 林甦 郑敏 黄梅清
• 来源期刊: 福建畜牧兽医
• 关键词: 多重荧光PCR 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌大肠杆菌 O157:H7 检测 食源性致病菌
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 22-27
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4331.2021.03.008

摘要

为了建立一种可快速特异检测生鲜肉中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7的多重实时荧光定量PCR方法,试验针对沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和大肠杆菌O157:H7 wzx基因的保守序列分别设计引物和Taqman探针,建立多重qPCR反应体系,进行特异性、灵敏度和重复性研究,用该方法检测30份生鲜肉中的3种食源性致病菌,并与国标法进行比较.结果表明:该方法只扩增3种靶细菌,对其它供试菌不扩增;金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测灵敏度均为105拷贝数/μL,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度为104拷贝数/μL;该方法的重复性良好;对30份生鲜肉进行检测,检出3份沙门氏菌、4份金黄色葡萄球菌和7份大肠杆菌O157:H7,与国标检测方法相比,大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌各有1份样品不符合,其它阳性样品完全一致.说明建立的基于Taqman探针的多重荧光定量PCR检测方法可以特异、快速地实现对生鲜肉中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7的检测.