水曲柳原生质体分离初探

• 作者: 王姿童 宋悦悦 刘林 薛佳丽 詹亚光 齐凤慧
• 来源期刊: 生物技术
• 关键词: 曲柳 原生质体 细胞活力 酶液组合
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 开发与应用|Development and Application
• 页码范围: 183-188
• 页数: 6页
• 分类号: Q943.2|S792.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2021.02.0028

摘要

[目的]通过优化限制因素,探索水曲柳原生质体制备的最佳方法.[方法]采用酶解法,对影响原生质体分离的影响因素,设计正交实验,通过显微镜观察计数比较原生质体的分离效果.[结果]在M7和M9的酶液组合对原生质体分离效果最好,产量分别为6.61×105个/g和5.76×105个/g,活力分别为97.57％和97.07％.在11％的渗透压中原生质体产量最高.pH 5.2时产量最高,pH值增加不利于原生质体产量增加.酶解时间对原生质体产量差异显著,虽然14h产量最高,但6h、8h、12h、14h之间产量差异不显著.[结论]采用酶解法初步获得了水曲柳原生质体分离的最适条件,在预处理3 h,渗透压为11％,在1.5％纤维素酶+0.8％离析酶+0.4％半纤维素酶中,pH值为5.2,黑暗条件下酶解14h.