磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/FoxO1信号通路和白细胞介素17在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中的表达变化

• 作者: 李倩 高杰 胡蓉 韩锋 李红 苏敏
• 来源期刊: 解剖学报
• 关键词: 实验性自身免疫性脑脊髓炎 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/FoxO1信号通路 Luxol fast blue染色 流式细胞术 免疫印迹法 酶联免疫吸附法 小鼠
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 神经生物学|Neurobiology
• 页码范围: 358-364
• 页数: 7页
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.03.005

摘要

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/FoxO1和白细胞介素17(IL-17)与自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病的相关机制.方法 将C57BL/6小鼠60只随机分为对照组和模型组(EAE),每组30只.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35～55)联合完全弗氏佐剂诱导建立EAE模型.观察各组小鼠的行为学评分,并于评分4分时取各组小鼠的脊髓、脾脏和外周血.HE染色及Luxol fast blue染色观察脊髓炎性细胞浸润及髓鞘脱失情况;脾细胞在体外用a-CD3和MOG35～55分别刺激7 d,收集其上清液,ELISA检测小鼠脾细胞上清液和血清中细胞因子白细胞介素17(IL-17)和干扰素γ(IFN-γ)的含量;流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+IL-17+细胞的百分比;Western blotting检测IL-17及PI3K/Akt/FoxO1在小鼠脊髓中表达.结果 与对照组相比,EAE组小鼠行为学评分明显高于对照组(P＜0.05);HE染色及Luxol fast blue染色结果显示,EAE组脊髓病理组织表现出炎性浸润和髓鞘脱失显著增多(P＜0.05).ELISA结果显示,EAE组血清中及体外培养脾细胞的上清中IL-17和IFN-γ的含量明显升高.流式结果表明,EAE组小鼠脾细胞中CD4+IL-17+T细胞的百分比明显增加(P＜0.05).Western blotting结果显示,EAE组小鼠脊髓IL-17、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平明显升高,但磷酸化FoxO1(p-FoxO1)蛋白水平显著降低(P＜0.05).结论EAE组小鼠脊髓中促炎因子IL-17分泌增加,可能与PI3K/Akt/FoxO1信号通路活化进而激活T细胞功能有关.