利用CRISPRi技术构建乙醛酸生物合成Corynebacterium glutamicum工程菌

• 作者: 梁咏思 沈凯佳 范许云 韩武洋 李天明
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷氨酸棒状杆菌 乙醛酸 规律间隔成簇短回文重复序列干扰 工程菌
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 170-176
• 页数: 7页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20191018-179

摘要

以谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicumATCC 13032)为出发菌株,敲除其支流代谢关键酶乳酸脱氢酶合成基因lldh,建立规律间隔成簇短回文重复序列干扰(clustered regularly interspaced short palindromic repeats interference,CRISPRi)调控体系,并利用该体系下调支流代谢中的关键酶异柠檬酸脱氢酶合成基因icd和苹果酸合成酶合成基因ms的表达强度,同时过表达异柠檬酸裂合酶合成基因icl,强化乙醛酸合成的通路.通过48 h连续监测工程菌和野生菌生长状况,并检测发酵终产物.结果显示:工程菌生长几乎不受影响,发酵液中乙醛酸质量浓度达到5mg/mL,实现了乙醛酸的积累,为谷氨酸棒状杆菌工业生产乙醛研究提供一定的参考.